中医药防治原发性肝癌机理研究进展

　　诱导肝癌细胞分化

　　恶性肿瘤被认为是一种细胞分化异常的疾病，但并非“一旦成为癌细胞，永远就是癌细胞”，大量研究发现，在一定条件和诱导分化剂作用下，肿瘤细胞可以被诱导分化为正常或接近正常细胞。这就为肿瘤的治疗和预防开辟了一条新的道路，肿瘤细胞诱导分化治疗已成为国际肿瘤治疗研究的一个热点。

　　在诱导肿瘤细胞分化的研究中，形态学上的分化成熟是表明肿瘤细胞分化的基本标志之一。如袁淑兰等将体外培养的SMMC-7721细胞经0.5μg/ml丹参酮处理4天后，用光镜及电镜观察，发现细胞排列稀疏，大小趋向一致，细胞核质比例变小，胞质内出现分化良好的细胞器；经细胞生长测定发现细胞生长抑制率为58.1%，台盼蓝染色未见死亡细胞；流式细胞术检测发现，c-myc基因表达明显下降，而c-fos基因表达增强。因此认为丹参酮可能是通过调节SMMC-7721细胞原癌基因的表达，抑制细胞进入S期，从而抑制细胞生长和诱导细胞分化的。

　　另外，生化特性和生理功能也是识别细胞分化的重要指标。黄炜等观察到，1.0mmol/L和3.0mmol/L桂皮酸均有显著抑制BEL-7402细胞增殖的作用，并能使代表肝细胞分化的鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)、酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶(TAT)和碱性磷酸酶(ALP)比活力明显升高(P<0.05、 P<0.01)，而使肝癌细胞异常分化的标志甲胎蛋白(AFP)分泌量和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性明显下降(P<0.05、 P<0.01)，可见桂皮酸有抑制BEL-7402细胞增殖和诱导分化其作用。

　　曾小莉等则从形态学和生化代谢两方面，观察了400μg/ml人参总皂甙对人肝癌细胞HepG2的诱导分化作用。发现癌细胞经处理后，在形态学上出现了向正常肝细胞方向逆转的现象，生长受到明显抑制；生化代谢上 ALP活性明显升高(P<0.01)，而AFP合成明显下降(P<0.01)；提示人参总皂甙可诱导人肝癌细胞分化。同样，张燕军等观察了苦参碱对SMMC-7721细胞的诱导分化作用，发现处理组细胞出现明显的增殖抑制，亚细胞结构趋于正常，AFP分泌量明显低于培养天数相同的对照组细胞，γ-GT活性逐日下降，TAT活性始终高于对照组细胞，处理6天后，细胞DNA含量降低，S期细胞数增加，可见，苦参碱可使SMMC-7721细胞聚集于S期，诱导其向正常肝细胞分化。

　　同样，中药血清药理学实验方法也被应用到诱导肿瘤细胞分化的研究中。黄育华等分别观察了富硒珍珠茶含药血清及其提取液直接添加，和叶下珠含药血清及其提取液直接添加对BEL-7402细胞诱导分化的影响，结果发现，富硒珍珠茶、叶下珠及两者含药血清都能够抑制细胞生长及克隆形成，减少细胞AFP的合成和分泌，抑制γ-GT活性，促进白蛋白(ALB)的合成和分泌，并呈一定的浓度和时间依赖关系，还可促使细胞形态向正常方向分化，从而对BEL-7402细胞起诱导分化作用。刘平等则选取临床肝癌治疗常用的益气药黄芪、白术，温阳药附子、肉桂，补肾药虫草菌丝、仙灵脾，养阴药麦冬、北沙参，分别制备含药血清作用于SMMC-7721细胞，结果发现，养阴药可显著抑制细胞增殖，余三组均无此作用；养阴药分别与其他三组药配伍后均可抑制细胞增殖，但只有益气养阴的作用显著强于养阴药；在降低细胞核浆比与AFP分泌量，提高ALB的合成、细胞内cAMP含量以及与P53蛋白、抑制P21ras蛋白表达等与其抑制增殖的结果基本一致；其中，以提高细胞内cAMP含量的作用最突出，与对照组相比，养阴药提高44.5%，益气药提高24.3%，而益气养阴组较养阴药提高60.3%，较维甲酸提高20.8%。可见，养阴药麦冬、北沙参可显著抑制肝癌细胞增殖、诱导细胞分化；益气药黄芪、白术对养阴药这一作用有显著放大作用，而提高细胞内cAMP含量是其主要作用环节。王昌俊等用扶正抗癌方含药血清处理SMMC-7721细胞一定时间后，也发现细胞内cAMP明显升高，ALB分泌增多，AFP的分泌减少，癌细胞活力明显减弱，说明扶正抗癌方对人肝癌细胞具有诱导分化作用。

　　提高荷瘤机体的免疫功能

　　近些年来，大量研究发现，许多中药在抗肝癌的同时，还能增强机体抗肿瘤免疫功能，从而调动机体自身的抗癌能力，以达到抑制肿瘤增殖和转移，延长生存期的目的。

　　现代研究表明，机体抗肿瘤免疫效应以免疫活性细胞为主，如NK细胞、T细胞、LAK细胞及巨噬细胞等。甲鱼多糖每天1μg/g体重口饲肝癌(B16)实体瘤正常荷瘤小鼠和免疫功能低下的荷瘤小鼠，发现其平均生存期分别为44.1±0.84天和38.5±1.19天，皆和对照组有显著性差异(P<0.01)，并可显著提高两种荷瘤小鼠NK细胞活性和T淋巴细胞转化率。同样可提高荷瘤小鼠T淋巴细胞转化能力的还有古卓良观察的白魔芋精粉，发现其还可显著增强荷肝癌(Heps)小鼠单核巨噬细胞吞噬能力，并使白魔芋精粉治疗组长瘤率和瘤重均明显小于对照组，可见其是通过增强机体免疫功能来抑制肿瘤生长，发挥抗肿瘤作用的。另外，高俊峰等在研究中药消结灵对小鼠移植实体型肝癌的抑制作用时，免疫组化染色也发现T淋巴细胞活性增强，并且枯否氏细胞功能旺盛，可分泌免疫调节因子破坏癌细胞。包旭、王耐勤等分别观察了中药制剂仁康胶囊和扶正抗癌口服液(天门冬、黄芪等)对小鼠移植性肝癌的影响，结果表明，两者除分别可明显延长腹水型肝癌小鼠生存期、抑制实体瘤生长外，还均具有显著增强单核巨噬细胞吞噬能力，增加血清溶血素含量的作用，且扶正抗癌口服液还对荷瘤小鼠脾淋巴细胞转化功能有明显促进作用(P<0.01)。

（编辑：小鱼 ）